米萱：外泌体在医美领域的应用丨专业视点

米 萱

整形大典·医学编委

       随着再生医学技术的不断发展，基于修复或再生细胞、组织或器官结构与功能的优势，使其在医学美容领域中具有突出的价值。外泌体作为再生医学的后起之秀，不仅在重大疾病如恶性肿瘤的功能研究及诊疗应用中发挥重要作用，在医疗美容基础和应用领域也备受关注。

       然而不管是护肤达人还是吃瓜群众，想必大家都很关心：究竟外泌体是“抗衰黑科技”、“水光天花板”，还是又一波智商税？

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外泌体究竟是什么？

       外泌体（EXo）是细胞释放的脂质双层膜性囊泡，属于细胞外囊泡（EVs）的一类，直径30-200nm，内含核酸、蛋白质、脂类，内镜下的外泌体呈“杯状”或“碟状”，排出后通过与细胞受体结合，行使信息传输、调节免疫、促进血管新生的作用。所有细胞类型包括肿瘤细胞均可以分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中，外泌体的功能主要取决于其来源的细胞类型，可参与机体免疫应答、抗原提呈、细胞迁移与分化、肿瘤侵袭等；

       1987年，科学家Johnstone首次将细胞分泌的囊泡样结构命名为外泌体（Exosome），2013 年，诺贝尔生物学或医学奖授予共同发现“外泌体囊泡准确转运物质的调控机制”的三位科学家，奖章他们第一次在国际上提出可以通过年轻干细胞外泌体恢复皮肤衰老细胞功能。

       2015年，国内专家在国际生物学杂志《Nature》上发表论文，证实了外泌体可以“激活细胞修复受损组织，直接参与细胞代谢，恢复细胞功能，继而可以延缓衰老”的相关研究成果；

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外泌体的来源？

       间充质干细胞（MSCs）是再生医学领域中使用最广泛的干细胞，离体增殖能力强，能够从多种组织中被分离得到，如骨髓、脐带、胎盘、脂肪等；免疫调节特性和高生产能力是MSCs所具备的两个显著特征；MSCs被认为是产生外泌体能力最强的细胞，已越来越多地被应用于临床治疗。

       研究表明间充质干细胞（MSC）分泌的Exo具有相当于或大于MSC本身的组织修复能力。更重要的是与细胞移植相比，Exo介导的无细胞治疗提供了更多的安全性，降低了MSC移植导致的异位组织形成的风险和免疫排斥的可能性。

       MSC-Exos（间充质干细胞旁分泌产生的外泌体）可以作为MSCs“无细胞”治疗剂，能够有效、促进皮肤伤口愈合、骨骼肌再生、骨折愈合和软骨再生等，体内外实验均显示出抗炎、抗衰老和创面愈合的作用；

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外泌体的分离提纯技术

       由于外泌体的大小、来源、内容物和功能均具有异质性，目前尚无标准、普适的外泌体分离技术，目前常用的分离方法有差速超速离心法、聚合物沉淀法、超滤法、免疫亲和色谱法等，各个方法各有利弊，需要综合考虑样本的体积、纯度、成本、仪器、时间和研究目的等因素选择合适的方法，目前为止仍没有一种方法能同时保证外泌体的含量、纯度和生物活性。

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成品化的外泌体在抗衰中的应用

       市面上存在的外泌体一般分三种形式，冷冻外泌体：多用于实验室研究，其保存方法和应用参考了细胞的冷冻保存方法，对科研人员的操作手法和相应的设备要求都非常高，并不适合大规模的应用市场；冻干粉外泌体：需要冷冻后抽真空，这样会造成外泌体膜内外压力急剧变化，使外泌体双分子膜结构破坏，丧失活性；活体化的外泌体：是把外泌体悬浮在液体基质中，避免储存、运输、使用过程中出现反复冷冻复融造成活性丧失；最佳温度37℃，且能维持结构完整和保持活性；

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在美容抗衰中的应用

作用机制：

       MSC来源的Exos可以激活损伤部位的细胞修复、募集内源性干细胞产生保护或者再生机制，改善局部缺氧微环境，还可以通过增加胶原沉积、促进血管生成、减少纤维化和抑制炎症反应等，对组织进行修复。作用于伤口皮肤，有效促进成纤维细胞的增殖和迁移，加速再上皮化，促进胶原再生，进而促进皮肤伤口愈合；另外可以激活内皮细胞中多种信号通路，诱导血管新生。

应用：

       1、瘢痕防治：

       外泌体对伤口愈合具有“双向调节”的作用，修复前期促进愈合，修复后期，预防瘢痕，瘢痕内注射可使瘢痕质地变软；

       2、皮肤：

       用于年轻化，可以靓肤、紧肤、淡化色沉，减少皱纹；用于问题肌肤：能够改善毛孔粗大、肤色暗沉，改善色斑、皱纹问题，改善痘印、皮肤泛红、干痒；

       3、脱发：

       Exos是一种很有前途的雄激素脱发（AGA）新疗法，研究发现Exos疗法可以使头发生长良好，而且无明显不良反应，具体用法：皮下浅层注射，1次/月，连续治疗4-6个月，能够促进毛囊乳头干细胞的增殖、分化，促进头皮毛细血管再生、增加毛囊组织，延长毛囊生长期，减缓退行期；

       4、妊娠纹、颈纹注射：

       可以淡纹、紧致；

       5、注射填充：

       用于面部凹陷填充、私密抗衰、手部抗衰，能够刺激真皮层胶原增多、皮下脂肪饱满；眼周注射：浅层注射皮肤，深层注射在眼轮匝肌后，改善眼周细纹，紧致皮肤，改善黑眼圈；